African Journal of
Biotechnology

  • Abbreviation: Afr. J. Biotechnol.
  • Language: English
  • ISSN: 1684-5315
  • DOI: 10.5897/AJB
  • Start Year: 2002
  • Published Articles: 12487

Full Length Research Paper

Identification and characterization of milk-clotting proteases produced by two species of mold

Aïcha Benlounissi
  • Aïcha Benlounissi
  • Département de Biologie, Faculté des Sciences, Université 20 Août 1955, Skikda, Algérie. - Laboratoire de Biologie de l'environnement, Département de Biochimie-Microbiologie. Faculté des Sciences de la nature et de la vie, Université Mentouri Constantine, Algérie; Laboratoire de Biologie de l'environnement, Département de Biochimie-MicrobiologieFaculté des Sciences de la nature et de la vie, Université Mentouri Constantine, Algérie.
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Aïcha Mechakra-Maza
  • Aïcha Mechakra-Maza
  • Laboratoire de Biologie de l'environnement, Département de Biochimie-MicrobiologieFaculté des Sciences de la nature et de la vie, Université Mentouri Constantine, Algérie.
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Loïc J. Blum
  • Loïc J. Blum
  • Équipe Génie Enzymatique, Membranes Biomimétiques et Assemblages Supramoléculaires, Institut de Chimie et Biochimie Moléculaires et Supramoléculaires, Université Lyon 1 - CNRS 5246 ICBMS, Bâtiment CPE - 43, bd du 11 novembre 1918 - 69622 Villeurbanne, Cedex, France.
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Christophe A. Marquette
  • Christophe A. Marquette
  • Équipe Génie Enzymatique, Membranes Biomimétiques et Assemblages Supramoléculaires, Institut de Chimie et Biochimie Moléculaires et Supramoléculaires, Université Lyon 1 - CNRS 5246 ICBMS, Bâtiment CPE - 43, bd du 11 novembre 1918 - 69622 Villeurbanne, Cedex, France.
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  •  Received: 16 August 2013
  •  Accepted: 26 February 2014
  •  Published: 12 March 2014

Abstract

Two strains of fungi were isolated and identified as Aspergillus tamarii and Penicillium pinophilum which showed good enzymatic activity on casein, 1933.33U and 1822, 21U, respectively. The search for milk clotting enzymes by fermentation at acid pH on culture medium containing whey and, after purification by molecular exclusion chromatography, affinity chromatography and SDS-PAGE helped to find two enzymes having a coagulant activity and approximately molecular weight of 35 and 30 KDa for Aspergillus tamarii and Penicillium pinophilum, respectively. The optimum pH of activity was 5.5 for both strains and the optimum temperature was 50 and 35°C for A. tamarii and P. pinophilum, respectively.

 

Key words: Aspergillus, Penicillium, milk-clotting enzyme, extraction and purification.